科研服務 時間：2020-07-17 16:39:00 瀏覽：7681次
產品介紹
基因敲除敲入技術一直是研究特定基因功能的有效工具。威斯騰生物利用最新的CRISPR/Cas系統可以有效的實現對細胞系特定基因的敲除和定點突變。
近10年來，mRNA在醫學應用領域取得顯著進展。研究人員可快速合成任意序列的mRNA片段，并能保存在室溫條件下。在無細胞的體系中利用DNA轉錄生成cap和poly A修飾的mRNA分子穩定性良好，而修飾堿基的mRNA在穩定性上更獲得大幅提升。在研究基因敲除動物及其胚胎發育中的基因表達時，科研人員往往都采用卵母細胞的mRNA顯微注射的方法，該方法在ZFN、TALEN、CRISPR、重編程細胞多能性等技術中得到廣泛應用。在這些基因編輯過程中使用mRNA較之DNA有諸多優點，例如無需進入核內并轉錄效率更快，RNA易降解也避免基因組遺傳重組現象。
我們利用該技術，定點敲除和修飾各種細胞系中的特定基因。對打靶細胞進行藥物篩選，利用CRISPR/Cas系統獲得的基因敲除細胞的剔除效率會明顯高于常規的利用RNAi和shRNA介導的基因敲落。
技術特色
1.可實現多個靶基因位點及多個基因的同時敲除
2.最新Nickase酶/雙gRNA技術，顯著降低脫靶率
3.無種屬限制，適用于各種細胞系的靶向敲除
操作流程
靶向目標序列sgRNA的設計及載體構建
目標細胞系共轉染
陽性細胞株的篩選和鑒定
應用范疇
基因功能分析：在細胞水平研究基因的功能
定點突變：建立點突變細胞，可用于藥物靶點研究。
啟動子功能分析：該方法建立的啟動子分析系統，可有效地分析內源性啟動子的強度，是一種最理想的分析系統。
參考細胞系
腫瘤細胞系： BEL-7402人肝癌細胞 CNE人鼻咽癌細胞 Hela人宮頸癌細胞 MCF-7人乳腺癌細胞等
神經細胞系：SK-N-SH人神經母瘤細胞
卵巢細胞系：SK-OV-3人卵巢癌細胞
血管平滑肌細胞系：VSMC血管平滑肌
成纖維細胞系：包皮成纖維細胞，心肌成纖維細胞
肺細胞系：SK-MES-1人肺鱗癌細胞 NCI-H460人大細胞肺癌細胞 A549人非小細胞肺癌細胞
腎細胞系：NRK腎小球足細胞
巨噬細胞：MH-S小鼠肺泡巨噬細胞 RAW 264.7小鼠單核巨噬細胞白血病細胞 THP-1人單核巨噬細胞
內皮細胞：HUVEC人臍靜脈內皮細胞
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具體CRISPR /Cas9細胞建系技術定制服務，歡迎聯系我們
威斯騰實驗服務流程
威斯騰生物服務項目
| 分子生物學檢測 | 蛋白質與免疫學 | 動物實驗 |
| 實時熒光定量PCR | 單克隆抗體制備 | 帕金森疾病模型 |
| 免疫共沉淀（Co-IP） | 多克隆抗體制備 | 抑郁癥動物模型 |
| ELISA（酶聯免疫吸附法）技術 | Western-blot 實驗服務 | 脊髓損傷模型 |
| 生化指標檢測 | 蛋白雙向電泳實驗服務 | 腦外損傷模型 |
| 雙熒光素酶報告基因檢測 | 原核蛋白表達純化 | 骨神經損傷模型 |
| 染色質免疫共沉淀（ChIP） | 真核蛋白表達純化 | 心肌缺血模型 |
| GST pull Down | ITRAQ定量蛋白質組學 | 心力衰竭模型 |
| SLAC蛋白組學 | 肺動脈高血壓動物模型 | |
| 高血壓模型 | ||
| 病毒包裝 | 實驗課題整體外包 | 粥樣動脈硬化模型 |
| 過表達/干擾慢病毒包裝純化 | 整體課題外包 | 大腦中動脈阻塞模型 |
| 過表達/干擾腺病毒包裝純化 | 細胞整體實驗外包 | 慢性之氣管炎模型 |
| 逆轉錄病毒包裝純化 | 動物整體實驗外包 | 過敏性哮喘模型 |
| 腺相關病毒包裝純化 | 肺炎大鼠模型 | |
| 肝炎-肝硬化-肝癌模型 | ||
| 蛋白芯片 | 原代細胞培養 | 肝纖維化模型 |
| 細胞因子芯片 | 骨髓間充質干細胞培養 | 膽結石模型 |
| BioPlex懸浮芯片 | 脂肪干細胞培養 | 急性胰腺炎模型 |
| 生長因子芯片 | 心肌成纖維細胞培養 | 急性腎衰竭模型 |
| 炎癥因子芯片 | 軟骨細胞培養 | 體內血栓模型 |
| 血管生成因子芯片 | 血管內皮細胞培養 | 關節炎模型 |
| 凋亡因子芯片 | 神經元細胞培養 | I型和II型糖尿病模型 |
| 趨化因子芯片 | 內皮組細胞原代培養 | 裸鼠成瘤 |
| HuProt TM 20K人類蛋白組芯片 | 基因編輯動物 | |
| 電生理相關服務 | 動物整體實驗服務 | |
| 膜片鉗實驗 | ||
| 細胞生物學檢測 | 高通量測序 | 代謝組學 |
| 細胞原代培養 | mRNA測序 | 氣相色譜GC/MS |
| MTT檢測 | LncRNA測序 | 液相色譜LC/MS |
| 細胞凋亡檢測 | 全基因組測序 | 核磁共震NMR |
| 細胞周期檢測 | RNA-Seq測序 | |
| 細胞克隆形成實驗 | 外顯子測序 | 影像學相關實驗 |
| Transwell細胞遷移/侵襲 | 16s擴增子測序 | Micro-CT |
| 流式分選 | Small RNA測序 | 小動物活體成像 |
| CCK8/XTT檢測 | 宏基因組測序 | 核磁共振 |
| 臺盼藍檢測細胞活性 | 單細胞測序 | PET-CT |
| 藥物篩選細胞學實驗 | circleRNA測序 | |
| 細胞粘附性檢測 | 甲基化測序 | 基因編輯動物 |
| 細胞劃痕實驗 | 條件性敲除小鼠/大鼠 | |
| 細胞生物學整體實驗 | 全基因敲除小鼠/大鼠 | |
| 細胞成管實驗 | ||
| 病理檢測 | CRISPR/Cas9細胞敲除/敲入 | 基因芯片 |
| 掃描電鏡 | 基因定點突變細胞系 | LncRNA芯片 |
| 透射電鏡 | 單基因敲除細胞系 | miRNA芯片 |
| HE染色 | 多基因敲除細胞系 | mRNA芯片 |
| 免疫組化 | 目的基因敲入細胞系 | 甲基化芯片（限人和小鼠來源樣本） |
| Tunel（原位末端凋亡法）檢測 | 報告基因敲入細胞系 | SNP芯片（限人和小鼠來源樣本） |
| 激光共聚焦 | miRNA/LncRNA敲除細胞系 | |
| 免疫熒光 | ||
| Masson染色 | CRISPR/Cas9動物敲除/敲入 | |
| 原位雜交 | 基因敲除大鼠/小鼠 |
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| 熒光原位雜交 | 基因敲入大鼠/小鼠 |
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| 特殊染色（PSA、茜素紅、阿爾新藍等） |
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| 行為學檢測 | 藥物篩選服務項目 | 藥效學評價 |
| 曠場實驗 | 高通量自動藥物篩選平臺 | 抗腫瘤藥物藥效學評價 |
| 重復性刻板行為檢測 | 細胞高內涵藥物篩選平臺 | 心血管系統藥物藥效學評價 |
| 動物跑臺檢測 | 蛋白質組學靶標研發平臺 | 泌尿系統藥物藥效學評價 |
| 強迫游泳 | 分子藥理研究平臺 | 內分泌系統藥物藥效學評價 |
| 生物膜片鉗藥物篩選平臺 | 抗炎免疫藥物藥效學評價 | |
| 常規藥物體外篩選 |
【本平臺合作項目】
分子生物學、細胞生物學、基因敲出/入、模式動物、SPF動物保種、病理學檢測、免疫學檢測、影像學檢測、原代培養、細胞藥篩、CRISPR/Cas9基因編輯、基因芯片、高通量測序、蛋白組學、代謝組學、高通量高內涵篩選、藥效學評價、藥理毒理學實驗、慢病毒包裝與穩轉株建立、SiRNA與納米載藥、ChIP、CO-IP、生物信息學分析、知識產權服務！
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