CRISPR/Cas9提高了基因編輯的準確性和特異性，使以前不可能開展的實驗成為可能。它的效率是傳統ZFN和TALEN系統的三到四倍。而且，只需導入幾個不同的引導RNA，即可刪除多個基因。該技術已廣泛用于構建敲除細胞系，在這類細胞系中，靶標基因可以精確刪除，從而完全去除其編碼的蛋白質。根據不同細胞特點選擇適宜的轉染方法（病毒法，化學轉染法或電轉法）將gRNA序列和Cas9蛋白轉入細胞中，并根據不同的轉染方法進行不同時長的藥篩。藥篩完成后進行單克隆篩選，通過靶位點擴增及測序驗證篩選出成功敲除的陽性克隆，最終交付純合子細胞株與相關數據報告。

基因編輯細胞服務說明：

基因情況：單基因或者多基因敲除

細胞類型：貼壁細胞、懸浮細胞

服務承諾：提供單克隆細胞株

服務優勢：

1. 速度：KO pool快至2周；KO單克隆純合子，快至1.5月;

2. 敲除保證：sgRNA 3～6條，確保獲得敲除株;

3. 多基因同敲：我司有兩種成熟的多基因敲除實驗體系，可同時/至少靶向3個基因靶點;

4. 團隊專業    我司Cas9基因編輯團隊目前已完成60余例細胞基因敲除案例，具備豐富的經驗；

5. 種子優良    所有細胞種子均從中科院細胞庫購買，代數低無污染；

6. 敲除無損    所有的敲除單克隆均通過多代次測序驗證，確保敲除性狀穩定不回復；

7. 質控嚴格    建系后連續3代細胞增殖活力評估。

基因敲除方案：
威斯騰生物根據客戶需求，結合靶基因的情況進行方案定制。通常情況下，對于每個基因，我們會設計3條sgRNA，靶向切割位置靠前的外顯子區域，通過細胞自身的非同源修復機制，在切割位置產生堿基的突變、插入或部分DNA序列的刪除，造成錯義突變、無義突變、移碼突變、片段缺失，進而影響下游RNA或蛋白的功能。

此外，威斯騰生物CRISPR/Cas9研發團隊推出pWST-KOS系列質粒，可同時介導多個基因靶點的切割，實現基因的大片段刪除，或同時刪除多個基因！

操作步驟：

交付內容：

1、經測序驗證的目的基因敲除細胞株及對照細胞株各2支，每支細胞量不少于1*106 Cells。

2、詳盡的實驗報告：包括細胞株培養信息、實驗步驟；sgRNA序列及測序峰圖；單克隆篩選測序驗證報告。

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